細菌・ウィルス検査

2024年6月5日 2024年11月14日

FlorenceMYM

いつもご覧いただきありがとうございます。

検査シリーズとしていくつかの検査に分けて紹介していきます。
シリーズ１は、血液検査についてご紹介いたしました。
シリーズ2では、細菌・ウィルス検査について触れていきます。
実習、臨床での参考にしていただければ幸いです。

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Ⅰ．細菌・ウィルス検査をする目的
Ⅱ．検査による病原体の特定
Ⅲ．検体の種類
Ⅳ．各検査の概要と特徴
Ⅴ．検査で調べられる病原体
Ⅵ．薬剤感受性検査
Ⅶ．薬剤耐性菌
参照文献
参照ホームページ

Ⅰ．細菌・ウィルス検査をする目的

１）病原体（細菌・真菌・ウィルス・原虫など）を特定する。
　この後に紹介する方法によって、症状を起こしている感染源を特定する。
２）病原体（細菌・真菌・ウィルス・原虫など）に効果のある薬剤を特定する。
　細菌には薬剤に対する耐性を持っているものがある。
　耐性菌に対して効果のある抗生剤を特定する検査がある。
　それを「薬剤感受性試験」といいます。

Ⅱ．検査による病原体の特定

検体の採取から提出までの概要は以下の通り。
①指示された病原菌（検体）を採取する。
　採取の際はスタンダードプリコーションをして、清潔な状態で行う。
　本来無菌である場所からの検体採取は特に注意を払い、
　コンタミネーションを防いで適切に検体を採取しましょう。
②検体を滅菌の容器などの指定の容器に入れて検査室へ提出する。

Ⅲ．検体の種類

・呼吸器系：喀痰、咽頭ぬぐい（粘液）、鼻腔ぬぐい（粘液）、気管支擦過物
　気管支肺胞洗浄液
・消化器系：便、胆汁
・泌尿器系：尿、尿管カテーテル先端、膣分泌物、前立腺分泌物
・血液：血液
・穿刺液：髄液、胸水、腹水、関節液、CVカテーテル先端
・その他：耳漏、褥瘡、組織、皮膚、爪、膿

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Ⅳ．各検査の概要と特徴

細菌検査には以下の5つの方法があります。
①塗抹染色検査
②培養同定検査
③PCR検査（ポリメラーゼ連鎖反応）
④抗原直接検出法
⑤抗原検出法

①塗抹染色検査

検体をスライドガラスに塗抹し染色する。顕微鏡で細菌の有無と菌の量を特定する検査。
最も早く、簡便に菌の存在を把握できる検査。
塗抹染色検査では死菌も陽性となる。
染色方法は以下の通り
「グラム染色」ブドウ球菌、肺炎球菌、レンサ球菌、腸球菌、カンジダ、クロストリジウム、
クリプトコッカス、淋菌、髄膜炎菌、インフルエンザ菌、カンピロバクター、ピロリ菌
「チール・ネルゼン染色」「蛍光（オーラミン）染色」結核菌、非結核抗酸菌
「墨汁染色」クリプトコッカス
「KOH染色」真菌

②培養同定検査

検体を培地で培養して増やし、菌種を特定する検査。
生きている菌のみが増殖するため、感染源の特定には最も有効だが、培養検査は判定までに時間がかかる2～4週間。
培地には「液体」と「固体」がある。

A:液体培地

細菌や酵母を培養して増殖できる。

B:固形培地

ﾌﾟﾚｰﾄに移すことでｺﾛﾆｰを形成させ、病原体を特定できる。
培養させたい目標の菌によって培地を変える。培地の種類は以下の通り。
・単純・基本培地：ブイヨンやペプトン水を含む培地で、各種細菌の単離や培養に使用される
・複合培地：各種栄養成分の混合物を含む培地で、チョコレート寒天、マッコンキー寒天
　などがある。
・規定培地：特定の細菌に必要な炭素と窒素を含ませた培地
・特殊培地：難しい細菌の増殖を促進し、標的以外の細菌の増殖を抑える特殊物質を含む培地。

③PCR検査（ポリメラーゼ連鎖反応）

PCRは、特定のDNA断片を増幅するために使用されます。例えば、病原体のDNAや遺伝子の増幅、DNAのクローニング、遺伝子型の解析などに利用される。
PCRはDNAポリメラーゼ酵素を用いて、DNA断片を特定のプライマー（オリゴヌクレオチド）で増幅する。反応は熱サイクルで行われ、DNA断片が指数的に増加する。PCRはDNA断片を増幅する技術。
培養できない微生物や成長の遅い微生物の道程も可能となる。
死んでいる菌でも陽性となる。

④抗原直接検出法

・蛍光抗体法：蛍光色素で標識した抗体と反応させて、抗原を視覚化する方法。
・酵素抗体法：酵素で標識した抗体と反応させて、抗原を視覚化する方法。
・ラテックス凝集法：ラテックス粒子という粒子に抗体を固相（貼り付け）し、
抗原とラテックス粒子を反応させて視覚化する方法。
・DNAプローブ法：DNAプローブ法は、特定のDNAまたはRNAを検出するために使用される。
　PCRと似ているが、PCRはDNA断片の増幅ができる技術で、DNAプローブ法は
　特定のDNAまたはRNAの検出ができる技術。

⑤抗原検出法

・迅速同定キット：病原体の材料から直接検出ができるキット。感染の流行や、感染者との接触などで、疑わしい病原体が限定されるときにはこのキットを使えば迅速に診断できる。

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